เซลล์ วิธีการระบุการสร้างแอนติบอดีแต่ละตัว AFC ได้รับการพัฒนาและเสนอในปี 2506 โดยผู้ได้รับรางวัลโนเบล ทำให้สามารถวิเคราะห์ประชากรของเซลล์น้ำเหลือง ด้วยจำนวนที่แน่นอนของ AFC ได้แม้ว่าจะผ่านไปแล้วกว่า 45 ปีนับตั้งแต่มีการประกาศวิธีการใหม่ แต่ก็ยังใช้ในการศึกษาทางภูมิคุ้มกันวิทยา วิธีการใหม่ที่แพร่หลายมากขึ้นสำหรับการประเมิน AFC ได้ปรากฏขึ้นที่เรียกว่าวิธีการของภาวะเม็ดเลือดแดงแตก การก่อตัวของคราบจุลินทรีย์ในวุ้น
เนื่องจากเนื้อหาข้อมูลและการเข้าถึงยังคงอยู่ใน การทดลองทางภูมิคุ้มกันวิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อศึกษาผลของปัจจัยต่างๆ ทางกายภาพ เภสัชกรรม พิษ ต่อการสร้างแอนติบอดีในสัตว์ทดลอง หลักการพื้นฐานของวิธีการทำให้เม็ดเลือดแดงแตกเฉพาะที่ คือจำนวน”เซลล์”เนื้อเยื่อน้ำเหลือง ม้าม ต่อมน้ำเหลืองของหนูที่ได้รับภูมิคุ้มกันด้วยเม็ดเลือดแดง จะถูกผสมในหลอดทดลองกับแรม เม็ดเลือดแดงและละลาย แต่ไม่ส่งผลกระทบต่อความมีชีวิตของเซลล์
ส่วนผสมจะถูกวางบนจานเพาะเชื้อ และหลังจากการฟักไข่ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ต่อหน้าส่วนประกอบต่างๆ จำนวนโซนภาวะเม็ดเลือดแดงแตก แผ่นโลหะในจานวุ้นจะถูกนับด้วยสายตา ตรงกลางของคราบจุลินทรีย์ แต่ละอันคือ AFC ซึ่งเป็นพลาสมาหรือเซลล์ลิมโฟบลาสติก เมื่อทราบจำนวนเซลล์ลิมฟอยด์ที่เพาะบนวุ้น เราสามารถคำนวณจำนวน AFC ต่อจำนวนเซลล์แครีโอไซต์คงที่ หรือต่ออวัยวะทั้งหมด วิธีการโดยตรงหลักการที่อธิบายข้างต้น
ตรวจจับ KLA ที่ผลิตแอนติบอดี IgM ที่สลายเม็ดเลือดแดงต่อหน้าส่วนประกอบ การใช้วิธีการทางอ้อมเป็นไปได้ที่จะตรวจจับ AFC ที่ผลิตแอนติบอดี IgG ATs สำหรับความมุ่งหมายเหล่านี้ สารแขวนลอยของเซลล์ถูกบำบัดเพิ่มเติมด้วยแอนติซีรัมของกระต่ายที่มีแอนติบอดีต้าน IgG ของเมาส์ที่จุดสูงสุดของการผลิต IgM-Ab แอนตี้เซรั่มที่ประกอบด้วย การใช้ IgM-AT กับหนู IgG ทำปฏิกิริยาในหลอดทดลองในวุ้นกับ IgG-AT กับเซลล์เม็ดเลือดแดงของแกะ
การเติมสารเสริม คอมเพล็กซ์นี้มีความสามารถ ในการสลายเม็ดเลือดแดง ดังนั้น ด้วยวิธีการทางอ้อมจะตรวจพบผลรวมของ AFC ที่สร้าง IgM และ IgG แอนติบอดี การใช้แรมเม็ดเลือดแดงร่วมกับแอนติเจนที่ละลายน้ำได้ ทำให้สามารถศึกษาไดนามิกของการก่อตัว AFC กับแอนติเจนที่ไม่มีอนุภาค วิธีการดัดแปลงของภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเฉพาะที่ สามารถใช้สำหรับการวิเคราะห์ AFC ในสัตว์หลายชนิดรวมทั้งในมนุษย์ เป็นครั้งแรกที่วิธีการทำให้สามารถเปิดเผยรูปแบบ
ปริมาณของพลวัตของการผลิตแอนติบอดี ระหว่างการสร้างภูมิคุ้มกันโรคเบื้องต้นและทุติยภูมิของสัตว์ เราแสดงรายการระเบียบเหล่านี้ ในระหว่างการสร้างภูมิคุ้มกันโรคเบื้องต้น ของหนูเมาส์ที่มีเม็ดเลือดแดงแรมจำนวน AFCs ที่ผลิต IgM-ATs จะเพิ่มขึ้นเป็นครั้งแรก จุดสูงสุดของการเกิด AFCs โดยเฉลี่ยในหนูเมาส์คือ 4 ถึง 5 วัน หลังจากนั้น 1 ถึง 2 วัน จำนวน AFCs ที่ผลิต IgG-ATs เพิ่มขึ้น ในระหว่างการฉีดวัคซีนรอง การตอบสนองของภูมิคุ้มกันจะดำเนินการส่วนใหญ่
เนื่องจาก KLA ที่ผลิต IgG หลังจากสร้างภูมิคุ้มกัน จำนวน AOK จะเพิ่มขึ้นในไม่กี่วันเป็น 500 ล้านเซลล์ การสะสมของ AFC ในเนื้อเยื่อน้ำเหลืองก่อนการตรวจหาแอนติบอดีในเลือด ในปริมาณเล็กน้อย AFCs มีมาก่อนในเนื้อเยื่อน้ำเหลือง AFCs พื้นหลัง การเพิ่มจำนวนของ AFCs หลังการให้ภูมิคุ้มกันเกิดขึ้นทีละน้อย ตามแนวโค้งที่ใกล้เคียงกับเลขชี้กำลัง กล่าวคืออันเป็นผลมาจากการสืบพันธุ์ของเซลล์ต้นกำเนิด จำนวนน้อยในตอนแรก AOK
หลังจากตรวจพบการสร้างภูมิคุ้มกันแล้วส่วนใหญ่ในม้าม ต่อมน้ำเหลือง ไขกระดูกและขาดในเนื้อเยื่ออื่นๆ ตับ ปอด ไต สมอง คำชี้แจงปฏิกิริยาสำหรับการตรวจจับ AOK วิธีการการเตรียมบทเรียนเบื้องต้น สำหรับกลุ่ม 10 ถึง 12 คน การสร้างภูมิคุ้มกันให้กับหนูที่มีเม็ดเลือดแดงของแกะ หนู ได้รับภูมิคุ้มกันทางหลอดเลือดดำด้วย 0.5 มิลลิลิตรของสารแขวนลอย 2 เปอร์เซ็นต์ของเม็ดเลือดแดงแกะที่ล้างแล้ว 4 ถึง 5 วันก่อนการทดลอง การเตรียมวุ้นสารละลาย 1.4 เปอร์เซ็นต์
วุ้นแห้ง 7 กรัมใส่ในขวดที่มีน้ำกลั่น 500 มิลลิลิตรและละลายในอ่างน้ำที่มีการกวนอย่างต่อเนื่อง วุ้นเหลวเทลงในถาด หลังจากที่วุ้นแข็งตัวแล้วจะหั่นเป็นก้อนขนาด 1 เซนติเมตร ซึ่งห่อด้วยผ้ากอซแล้วล้างด้วยน้ำไหลประมาณ 5 ถึง 7 วัน ก่อนบทเรียนก่อนการทดลอง เตรียมสารละลายวุ้น 0.7 เปอร์เซ็นต์ ในการทำเช่นนี้วุ้นที่ละลายไว้ล่วงหน้า 10 มิลลิลิตร 1.4 เปอร์เซ็นต์ ผสมกับน้ำกลั่น 8 มิลลิลิตรและสารละลายแฮงค์ 10 เท่า 2 มิลลิลิตร โซเดียมไบคาร์บอเนต 7.5 เปอร์เซ็นต์
หลังจากล้างด้วยน้ำเกลือ 3 ครั้ง สูตรโดยตรงของปฏิกิริยา ฆ่าหนูแล้วซ่อมมันบนโต๊ะ ม้ามถูกแยกออกเตรียมสารแขวนลอยของเซลล์ในตัวกลาง 199 ขนาด 3 มิลลิลิตร และนับจำนวนเซลล์นิวคลีเอตในสารแขวนลอย เตรียมเซลล์เจือจางด้วยความเข้มข้น 50×106 และ 10×106 ใน 1 มิลลิลิตรเตรียมส่วนผสมของวุ้น เม็ดเลือดและเซลล์ม้ามในการทำเช่นนี้ 0.1 มิลลิลิตรของสารแขวนลอย แรมเม็ดเลือดแดง 10 เปอร์เซ็นต์และ 0.1 มิลลิลิตร ของสารแขวนลอยเซลล์จะถูกเพิ่มลงในหลอดทดสอบ
บทความอื่นที่น่าสนใจ ➠ ข้ออักเสบ อธิบายภาวะแทรกซ้อนของการพัฒนาของโรคข้ออักเสบติดเชื้อ
